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技術(shù)文章
樣品前處理方式--使用冷凍研磨機(jī)于少量樣品研磨及優(yōu)缺點(diǎn)
樣品前處理
方式--
使用冷凍研磨機(jī)于少量樣品研磨及優(yōu)缺點(diǎn)
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北京星越生物
科技有限公司
BRANSON
(必能信)超聲破碎
產(chǎn)品
少量樣品處理
的回收率對(duì)一般的杵和硏砵是個(gè)挑戰(zhàn),100mg或甚至更少的樣品會(huì)如一層粉末覆蓋在硏砵上并很難回收。冷凍研磨機(jī)提供了另一個(gè)選擇。冷凍研磨機(jī)本質(zhì)上為一個(gè)微型杵臼,可用在非常少量的樣品,達(dá)到了
樣品前處理
所要求的結(jié)果。小型且緊密安裝的杵含有少量的樣品,可以讓研磨后的收集更加有效。冷凍研磨機(jī)使用與標(biāo)準(zhǔn)杵臼研磨相似,于冷凍研磨機(jī)使用時(shí),冷凍研磨機(jī)需先冷卻,接著將樣品加入。**個(gè)主要不同的地方在于冷凍研磨機(jī)的力量是來(lái)自手持自動(dòng)螺絲起子。這樣操作很麻煩,可考慮
超聲波破碎儀
來(lái)進(jìn)行。
準(zhǔn)備進(jìn)行化學(xué)溶解或機(jī)械加工的樣品的程序中,
樣品前處理
**步很適合使用低溫研磨。其確實(shí)能讓樣品從大型固體研磨成小的微粒且不會(huì)輸入大量的熱能。樣品以較小的微粒尺寸可快速的溶解,如RNA隔離,使用變性溶劑或離液劑(chaotropes)。使用低溫研磨機(jī)或杵臼執(zhí)行低溫研磨效率約可達(dá)到大部分一次性破壞方法的一半,*有效的兩階段步驟的29%。然而,與杵臼相比,冷凍研磨機(jī)確實(shí)可以產(chǎn)生比酵素釋放研究而更小的微粒。
使用冷凍研磨機(jī)進(jìn)行
樣品前處理
的肌肉所釋放的相對(duì)酵素活性
冷凍研磨肌肉細(xì)胞確實(shí)減少樣品尺寸,但樣品前處理的均質(zhì)效果明顯下降,效能為
30%
。
優(yōu)點(diǎn)
-
冷凍研磨機(jī)處理少量的冷凍
樣品前處理
更加有效率。冷凍研磨機(jī)與杵臼研磨樣品都很有效率,但研究使用兩種方法均質(zhì)肌肉組織的酵素分析指出,使用冷凍研磨機(jī)的方式會(huì)得到較好的酵素活性,即較小的微粒。加入萃取緩沖液,小的微粒會(huì)更迅速的溶解。另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是系統(tǒng)是機(jī)動(dòng)的,可以不另外費(fèi)力的處理更多的樣品。
限制
-
冷凍研磨機(jī)僅能處理少量的樣品(100 mg或更少),如此才能讓杵跟硏砵更有效的研磨。杵的尺寸也小,且必須保持在儲(chǔ)存桶內(nèi),例如制冷機(jī)(CryoCooler),使他們保持在低溫狀態(tài)。
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樣品處理方式介紹--攪拌機(jī)的優(yōu)缺點(diǎn)
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樣品前處理方式--Gringing(研磨)及優(yōu)缺點(diǎn)
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